用CRISPR/Cas12或Cas13新技術(shù)檢測DNA或RNA序列的特異性，通過酶識別一個特定的目標(biāo)序列，與該序列結(jié)合后，其核酸內(nèi)切酶活性被激活，并切割任何報(bào)告序列。該項(xiàng)技術(shù)可以很容易地與側(cè)流雜交檢測試紙條相結(jié)合，以顯示結(jié)果。

SHERLOCK

用CRISPR核酸酶進(jìn)行核酸檢測，博德研究所（Broad Institute）的研究人員近發(fā)表了一篇關(guān)于基于CRISPR的診斷平臺的文章，該平臺將核酸預(yù)擴(kuò)增與CRISPR-Cas酶學(xué)相結(jié)合，用于特定識別所需的DNA或RNA序列。所述技術(shù)稱為SHERLOCK（specific high-sensitivity enzymatic reporter unlocking特異性高靈敏度酶報(bào)告解鎖）方法。這種方法可以很容易地與側(cè)流雜交檢測試紙條相結(jié)合，以快速顯示結(jié)果。CRISPR/Cas酶Cas12或Cas13通過與特定靶點(diǎn)結(jié)合而被激活。當(dāng)被激活時，內(nèi)切酶能夠切割非特異性的報(bào)告物。一個簡單的、無儀器和便攜式的LFA（lateral flow assay側(cè)流分析）雜交檢測試紙條方法讀出SHERLOCK結(jié)果。

SARS-CoV-2 檢測

布勞頓（Broughton et al.）等人開發(fā)了一種與CRISPR-Cas12相關(guān)的檢測方法，用于在30分鐘內(nèi)從患者RNA中檢測SARS-CoV-2，稱為DETECTR。

上游反轉(zhuǎn)錄（RT）與環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增（LAMP）同時進(jìn)行（RT-LAMP）。之后，進(jìn)行Cas12特異性病毒序列檢測和報(bào)告分子的裂解。后一步是通過我們的側(cè)流雜交試紙條檢測進(jìn)行可視化。它的主要優(yōu)點(diǎn)是不需要任何儀器就能顯示出快速的結(jié)果。

默瑞生物

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